猪人工授精技术规程,影响猪人工授精效果的原

日期:2020-03-19编辑作者:养殖业资讯

人工授精技术在国外养猪业发达的国家和地区已经广泛运用,我国一些养猪大场也在运用该项技术进行猪的配种,该技术是养猪生产的高新技术,也是成熟的技术,运用这项技术可以加快猪种改良速度,有效降低生产成本,获得显著的经济效益。

目前猪人工授精技术在各大中小型猪场广泛应用,可以提高良种的利用率,减少饲养成本,克服配种困难,提高配种受胎率,增加产仔数,并减少疾病的传播,但是有的猪场应用此技术时效果并不理想,这主要是由公猪精液、母猪方面以及人为操作不当引起的。下面我们就来具体了解一下:影响猪人工授精效果的原因及猪的人工授精技术。

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种公猪在后裔遗传中占有50%的影响力,优良公猪的充分利用,将带来可观的经济效益,人工授精可大大提高公猪的利用率,减少公猪饲养量。此外,人工授精技术还在减少疾病传播、优良基因的迅速扩散、提高母猪受胎率等方面存在积极意义。 我国早在1950—1960年间就开始使用人工授精技术,但由于当时设备相对落后,未能在养猪业中获得理想的推广。自进入1990年以后,由于技术、设备的更新,该项技术得到迅速的普及,但由于缺乏一定的规范,养猪生产者使用效果不一。为进一步提高我国猪遗传进程,借鉴国外经验,特制订技术规程。

1 人工授精技术的优点

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猪人工授精技术是养猪生产中经济有效的技术措施之一,其最大的优点是减少猪群中所需公猪的总数,增加优良公猪的利用机会。由于猪的人工授精工作不仅需要高水平的管理,而且技术要求高,从采精、检验、稀释、分装、保存、运输及输精是一环扣一扣,无论那一环节出了问题,都会影响到最后的受胎效果。因此,在总结过去猪人工授精技术工作的基础上,制定一个统一的操作规程具有重大意义。

本标准的附录A、附录B、附录C都是标准的附录。本标准由中华人民共和国农业部提出。本标准由中华人民共和国农业部归口。本标准起草单位:全国畜牧兽医总站 农业部种猪质量监督检验测试中心本标准主要起草人:刘海良、吴秋豪、张守全、张国杭、刘小红、张代坚 中华人民共和国农业行业标准猪人工授精技术规程REGULATION FOR SWINE ARTIFICIAL INSEMINATION TECHIQUES ———————————————————————————————————————1 范围本标准规定采精、精液品质检查、精液的稀释、分装、贮存与运输、输精等人工授精技术环节,适用于猪的人工授精操作。2 采精2.1 公猪调教2.1.1 调教年龄 后备公猪7-8月龄可开始调教,有配种经验的公猪也可进行采精调教。2.1.2 调教方法 将成年公猪的精液、包皮部分泌物或发情母猪尿液涂在假台猪后部,将公猪引至假台猪训练其爬跨,每天可调教1次,但每次调教时间最好不超过15min。2.2 采精方法2.2.1 采精前准备 采精公猪的准备:剪去公猪包皮的长毛,将公猪体表赃物冲洗干净并擦干体表水渍。 采精器件的准备:集精器置于38℃的恒温箱中备用。当公猪引至采精室后,迅速取出集精器,另外应准备好采精时清洁公猪包皮内污物的纸巾或消毒清洁的干纱布等。 配置精液稀释液:配置好所需量的稀释液,置于在水浴锅中预热至35℃。精液质检设备的准备:调节好质检用的显微镜,开启显微镜载物台上恒温板以及预热精子密度测定仪。 精液分装器件的准备:准备好精液分装器、精液瓶或袋等。2.2.2 采精程序 采精员一手带双层手套,另一手持37℃保温杯用于收集精液,用0.1%高锰酸钾溶液清洗其腹部和包皮,再用温水清洗干净,避免药物残留对精子的伤害。 采精员挤出公猪包皮积尿,按摩公猪包皮,刺激其爬跨假台猪,待公猪爬跨假台猪并伸出阴茎,脱去外层手套,用手紧握伸出的公猪阴茎螺旋状龟头,顺其向前冲力将阴茎的“S”状弯曲拉直,握紧阴茎龟头防止其旋转。待公猪射精时用四层纱布过滤收集浓份或全份精液于保温杯内的一次性食品袋内,最初射出的少量精请不接取,直到公猪射精完毕,一般射精过程历时5—7min。 集精杯位置应高于包皮部,可防止包皮部液体流入集精杯内。2.3 采精频率 采精频率以单位时间内获得最多的有效精子数来决定,做到定时、定点、定人。成年公猪每周采精不超过2次,青年公猪每周1次。3 精液品质检查3.1 采精量 采集精液后称重,按每克1mL计,避免以量筒等测量精液体积。3.2 颜色 正常的精液是乳白色或浅灰色,精子密度越高,色泽愈浓,其透明度愈低。如带有绿色、黄色、浅红色、红褐色等异常颜色的精液应废弃。3.3 气味 猪精液略带腥味,如有异常气味,应废弃。3.4 pH值 以pH计或pH试纸测量,正常范围7.0~7.8。3.5 精子5 精子活力检查 精子活力是指呈直线运动的精子所占百分率,在显微镜下观察,一般按0.1~1.0的十级评分法估计,鲜精活力要求不低于0.7,检查活力时要求载玻片和盖玻片都应37℃预热。3.6 精子密度 指每毫升精液中所含的精子数,是确定稀释倍数的重要标准。要求用血细胞计数板计数或精液密度仪测定。血细胞计数方法:1)以微量加样器取具有代表性原精液200μL,用3%NaCl稀释10倍;2)在血细胞计数板上放一盖玻片,取1滴稀释液后精液置于计数板的槽中,靠虹吸将精液吸入计数室内;3)在高倍镜下计数5个中方格内的精子总数,将该数乘以50万,即得原精液每毫升的精子数。3.7 精子畸形率 畸形率是指异常精子的百分率,一般要求畸形率不超过18%,其测定可用普通显微镜,但需伊红或姬姆萨染色,相差显微镜可直接观察活精子的畸形率,公猪使用过频或高温环境会出现精子尾部带有原生质滴的畸形精子。畸形精子种类很多,如:巨型精子、短小精子、双头或双尾精子,顶体膨胀或脱落、精子头部残缺或尾部分离、尾部变曲。要求每头公猪每两周检查一次精子畸形率。3.8 填写公猪精液品质检查登记表● 考虑因素:哪些猪允许采精,应有些规定,精液产品,人工授精操作人员是否采用资格证书?4 精液稀释、分装、贮存和运输4.1 稀释液4.1.1 稀释液按稀释液配方,用称量纸、电子天平准确称量药品。4.1.2 按1 000mL、2 000mL剂量称量稀释粉,置于密封袋中。4.1.3 使用前1h将称量好的稀释粉溶液于定量的双蒸水中,可用磁力搅拌器助其溶解。4.1.4 用0.1N稀盐酸或0.1N氢氧化钠调整稀释液的pH值为7.2左右,稀释液配好应及时贴上标签,标明品名、配制日期和时间、经手人等。4.1.5 稀释液冰箱4℃保存,不超过24h。4.2 精液稀释4.2.1 精液采集后应尽快稀释,原精贮存不超过30min。4.2.2 未经品质检查或检查不合格的精液不能稀释。4.2.3 稀释液与精液要求等温稀释,两者温差不超过1℃,即稀释液应加热至33℃~37℃,以精液温度为标准,来调节稀释液的温度,绝不能反过来操作。4.2.4 稀释时,将稀释液沿盛精液的杯壁缓慢加入到精液中,然后轻轻摇动或用消毒玻璃棒搅拌,使之混合均匀。4.2.5 如作高倍稀释时,应先作低倍稀释,待半分钟后再将余下的稀释液沿壁缓缓加入。4.2.6 稀释倍数的确定:要求每个输精剂量含有效精子数30亿以上,输精量为80~100mL确定稀释倍数。4.2.7 稀释后要求静置片刻再作精子活力检查,如果稀释前后活力无太大变化,即可进行分装与保存;如果活力显著下降,不要使用。4.2.8 混合精液:新鲜精液首先按1:1稀释,根据精子密度和混合精液的量记录需加入稀释液的量,将部分稀释后精液放入水浴锅保温,混合2头以上公猪精液置于容器,加入剩余部分稀释液,混合后再进行分装。4.3 精液分装4.3.1 调好精液分装机,以每80~100mL为单位,将精液分装至精液瓶或袋。4.3.2 在瓶或袋上标明公猪品种、耳号、生产日期、保存有效期、稀释液名称和生产单位等。4.4 精液贮存4.4.1 精液置于室温1~2h后,放入17℃恒温箱贮存,也可将精液瓶或毛巾包严直接放入17℃恒温箱内。4.4.2 短效稀释液可保存3天、中效稀释液可保存4~6天、常效稀释液可保存7~9天,无论何种稀释液保存精液,应尽快用完。4.4.3 每隔12 h轻轻翻动一次,防止精子沉淀而引起死亡。4.5 精液运输 精液运输应置于保温较好的装置内,保持在16℃~18℃,精子运输过程中避免强烈震动。5 输精5.1 输精的时间 发情母猪出现静立反射后8~12h进行第一次输精,之后每间隔8~12h进行第2或第3次输精。5.2 精液检查 从17℃恒温箱中取出精液,轻轻摇匀,用已灭菌的滴管取1滴放于预热的载玻片,置于37℃的恒温箱上片刻,用显微镜检查活力,精液活力≥0.7,方可使用。5.3 输精管 用灭菌后输精管进行输精。5.4 输精程序5.4.1 输精人员消毒清洁双手。5.4.2 清洁母猪外阴、尾根及臀部周围,再用温水浸湿毛巾,擦干外阴部。5.4.3 从密封袋中取出灭菌后的输精管,手不应接触输精管前2/3部分,在其前端涂上润滑液。5.4.4 将输精管45度角向上插入母猪生殖道内,当感觉有阻力时,缓慢逆时针旋转同时前后移动,直到感觉输精管前端被锁定,并且确认被子宫颈锁定。5.4.5 从精液贮存箱取出品质合格的精液,确认公猪品种、耳号。5.4.6 缓慢颠倒摇匀精液,用剪刀剪去瓶嘴,接到输精管上,轻轻压确保精液能够流出输精瓶。5.4.7 控制输精瓶的高低来调节输精时间,输精时间要求3~10min。5.4.8 当输精瓶内精液排空后,放低输精瓶约15秒,观察精液是否回流到输精瓶,若有倒流,再将其输入。5.4.9 在防止空气进入母猪生殖道的情况下,把输精瓶后端一小段折起,放在输精瓶中,使其滞留在生殖道内5min以上,让输精管慢慢滑落。5.4.10 登记输精记录表

提高优秀种公猪的利用率,加快猪种遗传改良的速度,提高商品猪质量。

1、影响猪人工授精效果的主要因素

本标准适用于广西境内各级猪场、猪人工授精站和养猪专业户。适用的公猪为长白、汉普夏、杜洛克、约克夏、巴克夏和广西地方猪品种等。其它品种猪参照执行。

克服公、母猪因体格大小差异所造成的配种困难,提高配种妊娠率及分娩率。

1.1 精液品质因素

1、公猪

减少由于配种所带来的疾病传播。

精液品质的好坏直接关系到母猪受胎率的高低,当精液中死精超过20%或活力低于0.7时,母猪的受胎率和产仔数就会受到影响。精液品质不良主要表现为精子活力不够、数量过少、形态畸形等。精子活力不够主要是由种公猪饲养水平较低或与品种有关。不同品种的猪,其精液质量亦有不同。在进行精液采集时,公猪尿液、包皮液及生殖道内含有的微生物对精液有一定的毒害作用。在进行精液稀释时,由于对原精和商品精液中精子数量测量不准确.导致精子数量过少。精液在保存过程中,存储条件不符合标准,在热应激和冷应激的作用下,精液品质会发生变化。

经种猪测定站或县以上畜牧行政主管部门审定及检疫符合种公猪标准,发给合格证的公猪,方可作为种公猪使用。

确保配种环节中的公猪精液质量, 有利于母猪配种妊娠率的提高;克服时间和区域的差异,适时配种。

1.2操作因素

滤精量100毫升。

减少种公猪饲养数量,节省公猪饲养费用,提高经济效益。

相关人员未能准确判断母猪的发情时间,即给母猪进行人工输精。输精过程未按照标准的操作规程对母猪的外阴及器具进行清洗、消毒,导致母猪感染细菌或病毒,引起母猪发生繁殖障碍性疾病。输精过程中,由于操作方法不正确,输精管未能插入到达子宫颈口,导致精液未能进入子宫内。输精时间不够,由于子宫吸收精液需要一定的时间过程,输精过程太快,精液来不及完全被子宫吸收,易发生倒流现象。输精结束后,没有驱赶母猪运动,母猪趴卧引起精液倒流。以上人为因素都会对母猪人工授精的受胎率和产仔数造成不利影响。

精子活率70%。

2 采精

2、技术要点

精子密度中等以上。

2.1 采精前的准备及采精次数

2..1精液采集

公猪使用年限10月龄至4 岁。

2.1.1 公猪的选择

公猪的精液质量是影响人工授精效果的重要因素。种公猪应该选择体质坚实、体型比较匀称、雄性特征非常明显、遗传稳定和精液品质高的优良品种。采精之前对所用器具要进行消毒,确保用具处于无菌状态。采精过程也要进行无菌操作,对种公猪的生殖器官消毒后,必须用纯净水反复冲洗几次,以防止残留消毒剂影响所采精液的品质。在精液检测过程中,一定要要按规程精心操作,避免由于人为原因造成精液品质下降,影响受胎率。精液的外观评定可判定精液是否正常,颜色为乳白色或灰白色属正常颜色,出现脏物,如毛、血、尿、脓,说明精液污染或生殖道患炎症,应立即将精液废弃。正常公猪精液具有一种特殊的腥味,但没有臭味,有臭味或腐味均为异常精液。精液外观像棉絮一样混浊,整体性好,说明精液精子数量较多。

2、采精准备

采精用的公猪应满7月龄,体重在110~120kg的健康的优秀公猪(经性能测定后再选更佳)。种公猪一般每7d采精1次;满12月龄后,每周可增加到2次;成年后每周采精2~3次,采精次数过频,则精液中精子的密度降低,采精次数太少,则精液中死精子及畸形精子增多。采精用的公猪一般使用2~3年后即淘汰,也可以根据猪种改良的实际需要,及时用更优秀的公猪进行更新。

2..2 精液的处理

采精台的制作

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精液检查合格后,要对精液进行稀释、分装、保存和运输。稀释精液前,应先将稀释剂进行预热,使其与精液温度相差不超过1℃,稀释精液时,将一定量的稀释液沿器壁缓缓倒入装有精液的器皿中,轻轻摇晃器皿,使精液和稀释液充分混合,如果环境温度比较低时,可适当加快稀释的速度。如果要稀释倍数较大时,应先进行低倍稀释,防止精子环境改变过快,造成精子损伤。稀释后的精液要进行分装,装精液的瓶子要求材质无毒无害,并经无菌处理,精液瓶瓶口要做好密封,分装后的精液产品要注明标签,标签上包括公猪品种、耳号、生产日期、保存时间等信息,最后封好口。精液分装后要采用常温液态,应置于16 -18℃恒温条件下保存,精液保存时间最好不要超过3天,每隔12 h,将精液瓶倒置1次,以保证精子均匀的分布。

用一个直径为20厘米,长120厘米的园木,两端削成弧形,安装四条腿,在木头上面铺一层稻草或旧棉胎等有弹性的软物,外面包一层软胶皮或猪皮(亦可用铁支焊接为半园,四条腿能活动的采精台)。组装后采精台后高60厘米,前高50厘米。

2.1.2 所需器械

2..3操作

采精器具的消毒

采精杯,用前应预热并保持在37℃,(可在40℃左右的热水中预热)将消毒纱布或滤纸固定在杯口处,并微向内凹;乳胶手套一副;假台猪一个。

输精前对母猪阴部进行清洗、消毒,再用无菌纯净水将消毒药冲洗干净,这是为了预防消毒液对精子造成伤害。可在消毒过的输精管前段涂抹一定量润滑剂,利于输精管的插入。输精管其沿45度角向上插入母猪生殖道内,当向前有阻力时,可左右捻转输精管并缓慢插入,感觉向外拔出有阻力时,输精管已经插入到位,即可开始输精。

胶质器具经洗涤剂洗净凉干后,隔水煮沸30分钟。玻璃搪瓷、金属等 器具经洗涤剂净凉干后和160—200℃干燥箱消毒30--60分钟。

准备一个采精的地方,该处要防止积水地滑。

精液在使用前都需要摇匀,一般每天摇2次。一个输精剂量一般要求有效精子数25亿,输精量80-100 mL,输精部位为母猪子宫颈内,输精过程要保持环境安静,输精时,不要用外力挤入精液,精液会被子宫自动吸入,输精缓慢的母猪,可按摩乳房或压背的方法,加快精液的吸入速度。输精结束后,为防止精液倒流,不要马上拔出输精管,自行脱落最好。

集精 在采精前用5%葡萄糖溶液或稀释液冲洗一次,然后在集精杯上覆盖四层纱布。

采精用公猪要预先进行采精训练,使之适应假台猪采精,要事先清理采精公猪的腹部及包皮部,除去脏物和剪掉包皮毛。

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采精操作者、种公猪、采精台以及一切与精液直接接触的器材都应严格进行常规消毒处理。器材温度均应保持在30℃左右。

2.2 采精方法

人工授精技术在国外养猪业发达的国家和地区已经广泛运用,我国一些养猪大场也在运用该项技术进行猪的配种,该技术是养猪生产的高新技术,也是成熟的技术,运用这项技术可以加快猪种改良速度,有效降低生产成本,获得显著的经济效益。 1、人工授精技术的优点 提高优秀种公猪的利用率,加快猪种遗传改良的速度,提高商品猪质量。 克服公、母猪因体格大小差异所造成的配种困难,提高配种妊娠率及分娩率。 减少由于配种所带来的疾病传播。 确保配种环节中的公猪精液质量, 有利于母猪配种妊娠率的提高;克服时间和区域的差异,适时配种。 减少种公猪饲养数量,节省公猪饲养费用,提高经济效益。 2、采精 2.1 采精前的准备及采精次数 2.1.1 公猪的选择 采精用的公猪应满7月龄,体重在110~120kg的健康的优秀公猪(经性能测定后再选更佳)。种公猪一般每7d采精1次;满12月龄后,每周可增加到2次;成年后每周采精2~3次,采精次数过频,则精液中精子的密度降低,采精次数太少,则精液中死精子及畸形精子增多。采精用的公猪一般使用2~3年后即淘汰,也可以根据猪种改良的实际需要,及时用更优秀的公猪进行更新。 2.1.2 所需器械 采精杯,用前应预热并保持在37℃,(可在40℃左右的热水中预热)将消毒纱布或滤纸固定在杯口处,并微向内凹;乳胶手套一副;假台猪一个。 准备一个采精的地方,该处要防止积水地滑。 采精用公猪要预先进行采精训练,使之适应假台猪采精,要事先清理采精公猪的腹部及包皮部,除去脏物和剪掉包皮毛。 2.2 采精方法 通常采用徒手采精法,此种方法由于不需要特别设备,操作简便易行。采精时,待公猪将阴茎完全伸出后,采精人用手握住公猪阴茎的前部,千万不要松手,并适当调整手心的松紧程度,以便能够采到更多的优质精液,在公猪刚刚射精时,要放弃最初的部分,为使公猪射精更多,可在公猪射精的适当时机用拇指摩擦公猪的龟头部。 3、精液质量检查 3.1 精液的一般性状检查 射精量一次采精时公猪射出精液的数量为150~400m1。公猪射精过多或过少,应分析原因。过少可能采精次数过多,或公猪生殖机能衰退,或日常管理不当,或采精技术不熟练造成;过多则可能有水分混入,或是由于副性腺分泌过多,或混入尿液等。此外,精液中不应有毛发、尘土或其它污染物,含有凝固和成块物质的精液,表明生殖系统有炎症,这种精液不能使用。 色泽正常精液为淡乳白色或淡灰白色。如精液呈淡绿色是混有脓液,呈淡红色是混有血液,呈黄色是混有尿液,均不能使用。 气味一般正常精液无味或微带有腥味,带臭味或尿味的精液不正常,不能作输精用。 PH值猪精液为弱碱性,PH值为7.5左右。可以用比色纸测定 3.2 精子活率检查 活率是指在公猪精液中具有直线前进运动的精子在总数中所占的百分率。它与精子受精能力密切相关,是评定精液品质的重要指标。一般要求在每次采精后、精液稀释后、输精前均应进行活率检查。 悬滴检查法是在盖玻片上滴一滴精液,然后将盖玻片翻转覆盖在凹玻片的中间,制成悬滴标本。使用带有加热板的显微镜(或将显微镜置于37~38℃的保温箱中)检查,放大200~400倍观察精子呈直线运动的状况,按十级评分法评定。如视野中有10%的精子呈直线前进运动,评定为0.1级,有20% 的精子呈直线前进运动,评定为0.2级,依此类推。活率不低于0.7级才可进行稀释配制,若为冷冻精液,解冻后不应低于0.3级,才可用作输精。 银河娱乐网站手机版 5

采精

通常采用徒手采精法,此种方法由于不需要特别设备,操作简便易行。采精时,待公猪将阴茎完全伸出后,采精人用手握住公猪阴茎的前部,千万不要松手,并适当调整手心的松紧程度,以便能够采到更多的优质精液,在公猪刚刚射精时,要放弃最初的部分,为使公猪射精更多,可在公猪射精的适当时机用拇指摩擦公猪的龟头部。

3.3 精子密度检查 精子密度是指1ml精液中精子的数量。这也是评定精液品质的一个重要指标,同时也是确定输精量的依据。 估测法是检查精子密度常用的一种方法,可与精子活力检查同时进行。用玻棒取原精液一滴于载玻片上,加盖玻片做成压片,在显微镜下放大400~600倍检查,根据视野中精子分布情况和稠密度分为密、中、稀三个等级。密:整个视野中布满精子,精子之间的空隙小于一个精子长度,看不清各个精子的活动,每毫升”密”级精液含有精子约10亿个以上。中:视野中精子较多,可见各个精子活动,精子之间的间隙在 1~2个精子长度间,每毫升“中”级精液含有精子约2~8亿个。稀:视野中精子很稀少,精子之间的间隙在2个精子长度以上,每毫升“稀”级精液含有精子约2亿个以下。在生产实践中,活力与密度结合评定。要求公猪精液达到”中”级密度,”稀”级密度活力在80%以上,才可用于输精。还可用类似血细胞计数法测定精子密度,较费工时,可用于全面检查公猪精液品质时采用。此外,还可用光学仪器,如分光光度计、光电比色计等测定,测定准确迅速。 3.4 精子形态学检查 主要检查精子畸形率,即畸形精子占精子总数的百分率,要求畸形率不超过18~20%为宜,否则不能作输精用。 畸形精子种类很多,如头部畸形包括头部巨大,瘦小、细长、圆形、双头等,颈部畸形如颈部膨大,纤细、屈折、不全、带有原生质滴、不鲜明、双颈等;中段畸形包括弯曲、螺旋形、回旋、短小、长大、双尾等。畸形精子产生的原因有:公猪利用过度或饲养管理不良,或长期未配种,采精操作不当,睾丸和附睾疾病等。 检查方法:抹片取原精液一滴作抹片,自然干燥;用96%的酒精或5%福尔马林固定2~3min,用水冲洗;再用美蓝或龙胆紫等染色液染色3~5min,用水冲洗;待干后,在显微镜下放大400~600倍检查。也可将步骤合二为一,即染色固定:用龙胆紫酒精液或红、蓝墨水染色3~5min,用水冲洗,干后检查。 3.5 精液稀释与分装 稀释液的准备:专用稀释剂有KlEV、BTS、20rPVa等。所有的商品稀释剂均表明了使用方法及用途(包括配制方法及保存天数)。 稀释份数的确定:确定稀释份数的依据是精子密度,如果现场没有条件用显微镜检查精子密度,通常可进行6~8倍稀释。 精液的稀释:应小心地将精液倒入稀释液,稀释液与精液温度一致,起码不能相差1℃。 稀释后的精液分装:稀释后的精液即可用于母猪的输精,为方便使用、运输和保存、通常分装在特制的一次性塑料瓶或塑料袋中待用,塑料瓶或塑料袋的容量通常是100ml,可装60~80ml精液。可用不同颜色的塑料瓶装不同品种猪的精液,以示区分,并粘贴标签,注明日期,公猪品种,耳号及精液编号等,瓶装精液便于输精操作。 新鲜精液在现场如即采即用,可用等渗的葡萄液或等渗的葡萄糖生理盐水做63~5min 8倍的稀释。这种方法省事又有效。 抗生素等添加剂必须在稀释消毒冷却室温后再加入,否则影响其效价。 3.6 注意事项 分装后的精液如果要保存备用,则不可立即放入17℃左右的恒温冰箱内,应先留在冰箱外 1h左右,让其温度下降,以免因温度下降过快而刺激精子,造成死精子等增多。 从放人冰箱开始,每隔12h,要摇匀一层精液,因精子放置时间一长,会大部分沉淀。每次摇动时,动作要轻缓均匀,同时观察精液的色泽状况,并做好记录,发现异常及时处理。 保存过程中,要切实注意冰箱内温度的变化,以免因意想不到的原因而造成电压不稳而导致温度升高或降低。 远距离购买精液时,运输是关键的环节。高温的夏天,一定要在双层泡沫保温箱放入冰块,再放精液进行运输,以防止天气过热,死精太多,严寒的季节,要采取保温措施防止精液因寒冷使精子死亡。

采精应在室内进行。采精室应清洁无尘,安静无干扰,地面平坦不滑。

3 精液质量检查

采精员穿戴洁净工作衣帽,长胶鞋, 胶手套。胶手套应先用75%酒精消毒、凉干,30分钟后使用。

3.1 精液的一般性状检查

采精前,将公猪赶进采精预备室后,应在40℃温水洗净包皮及其周围,再用0.1% 高锰酸钾溶液擦洗、抹干。

射精量一次采精时公猪射出精液的数量为150~400m1。公猪射精过多或过少,应分析原因。过少可能采精次数过多,或公猪生殖机能衰退,或日常管理不当,或采精技术不熟练造成;过多则可能有水分混入,或是由于副性腺分泌过多,或混入尿液等。此外,精液中不应有毛发、尘土或其它污染物,含有凝固和成块物质的精液,表明生殖系统有炎症,这种精液不能使用。

采精方法,主要用手采法。

色泽正常精液为淡乳白色或淡灰白色。如精液呈淡绿色是混有脓液,呈淡红色是混有血液,呈黄色是混有尿液,均不能使用。

采精时,采精员站于采精台的右后侧,当公猪爬上采精台后,采精员随即蹲下,待公猪阴茎伸出时,用手握紧其阴茎龟头,特别是要抓住螺旋部分,压力不宜太大,以控制其龟头不能转动或回缩为限,并带有松紧节奏,以刺激射精。当公猪充分兴奋,龟头频频弹弹动时,表示将要射精。公猪开始射精时多为精清,不宜收集,待射出较浓稠的乳白色精液时,应立即以右手持集精杯,放在稍离开阴茎龟头处将射出的精液收集于集精杯内。当射完第一次精后,刺激公猪射第二次, 继续接收。射完精后,待公猪退下采精台时, 采精员应顺势用左手将阴茎送人包皮中。不得粗暴推下或抽打公猪。

气味一般正常精液无味或微带有腥味,带臭味或尿味的精液不正常,不能作输精用。

精液检查

PH值猪精液为弱碱性,PH值为7.5左右。可以用比色纸测定

精液量、色泽、气味、PH值

3.2 精子活率检查

公猪的射精量,一般为100—300毫升,正常精液的色泽为乳白色或灰白色,略有腥味,精液PH值为6.8—7.2。

活率是指在公猪精液中具有直线前进运动的精子在总数中所占的百分率。它与精子受精能力密切相关,是评定精液品质的重要指标。一般要求在每次采精后、精液稀释后、输精前均应进行活率检查。

精子浓度:精子浓度是指每毫升精液中含有精子数的多少。

悬滴检查法是在盖玻片上滴一滴精液,然后将盖玻片翻转覆盖在凹玻片的中间,制成悬滴标本。使用带有加热板的显微镜(或将显微镜置于37~38℃的保温箱中)检查,放大200~400倍观察精子呈直线运动的状况,按十级评分法评定。如视野中有10%的精子呈直线前进运动,评定为0.1级,有20% 的精子呈直线前进运动,评定为0.2级,依此类推。活率不低于0.7级才可进行稀释配制,若为冷冻精液,解冻后不应低于0.3级,才可用作输精。

测定方法:

3.3 精子密度检查

检查精子浓度用血球计数器计算。其方法是用白血球吸管吸取精液至刻度0.5处,再吸取3%氯化钠溶液至刻度101处,捏住吸管的两端充分振荡后,将吸管前部的滤体吹弃2—3滴,然后滴一小滴于计算玻板上盖玻片边缘,使其自行渗入计算室内,待液体稳定后,在400~600倍的显微镜下计数。观察计数时应数五个有代表性的中方格内的精子数,对头部压在方格四边线上的精子,只能计算两条边上的。每次要做2—3 遍,求其平均值。最后将精子总数乘以 10000,就得每立方毫米精液中所含精子数,再将此数乘以1000,便得每毫升精液的精子数。

精子密度是指1ml精液中精子的数量。这也是评定精液品质的一个重要指标,同时也是确定输精量的依据。

精子活力

估测法是检查精子密度常用的一种方法,可与精子活力检查同时进行。用玻棒取原精液一滴于载玻片上,加盖玻片做成压片,在显微镜下放大400~600倍检查,根据视野中精子分布情况和稠密度分为密、中、稀三个等级。密:整个视野中布满精子,精子之间的空隙小于一个精子长度,看不清各个精子的活动,每毫升”密”级精液含有精子约10亿个以上。中:视野中精子较多,可见各个精子活动,精子之间的间隙在 1~2个精子长度间,每毫升“中”级精液含有精子约2~8亿个。稀:视野中精子很稀少,精子之间的间隙在2个精子长度以上,每毫升“稀”级精液含有精子约2亿个以下。在生产实践中,活力与密度结合评定。要求公猪精液达到”中”级密度,”稀”级密度活力在80%以上,才可用于输精。还可用类似血细胞计数法测定精子密度,较费工时,可用于全面检查公猪精液品质时采用。此外,还可用光学仪器,如分光光度计、光电比色计等测定,测定准确迅速。

精子活力是以直线前进运动的精子占总精子数的比率来确定的。一般采取“十 级制评分法”进行评定。

3.4 精子形态学检查

精子活力测定方法:将精液滴在载玻片上,再盖上盖玻片,然后在35℃左右显微镜下放大150—200倍,仔细观察精子活动情况。

主要检查精子畸形率,即畸形精子占精子总数的百分率,要求畸形率不超过18~20%为宜,否则不能作输精用。

精子活力等级评定

畸形精子种类很多,如头部畸形包括头部巨大,瘦小、细长、圆形、双头等,颈部畸形如颈部膨大,纤细、屈折、不全、带有原生质滴、不鲜明、双颈等;中段畸形包括弯曲、螺旋形、回旋、短小、长大、双尾等。畸形精子产生的原因有:公猪利用过度或饲养管理不良,或长期未配种,采精操作不当,睾丸和附睾疾病等。

1.0级指有100%精子呈直线式前进运动。

检查方法:抹片取原精液一滴作抹片,自然干燥;用96%的酒精或5%福尔马林固定2~3min,用水冲洗;再用美蓝或龙胆紫等染色液染色3~5min,用水冲洗;待干后,在显微镜下放大400~600倍检查。也可将步骤合二为一,即染色固定:用龙胆紫酒精液或红、蓝墨水染色3~5min,用水冲洗,干后检查。

0.9级指有90%精子呈直线式前进运动。

3.5 精液稀释与分装

0.8级指有80%精子呈直线式前进运动。

稀释液的准备:专用稀释剂有KlEV、BTS、20rPVa等。所有的商品稀释剂均表明了使用方法及用途(包括配制方法及保存天数)。

0.7级指有70%精子呈直线式前进运动。

稀释份数的确定:确定稀释份数的依据是精子密度,如果现场没有条件用显微镜检查精子密度,通常可进行6~8倍稀释。

银河娱乐网站手机版 ,0.6级指有60%精子呈直线式前进运动。

精液的稀释:应小心地将精液倒入稀释液,稀释液与精液温度一致,起码不能相差1℃。

0.5级指有50%精子呈直线式前进运动。

稀释后的精液分装:稀释后的精液即可用于母猪的输精,为方便使用、运输和保存、通常分装在特制的一次性塑料瓶或塑料袋中待用,塑料瓶或塑料袋的容量通常是100ml,可装60~80ml精液。可用不同颜色的塑料瓶装不同品种猪的精液,以示区分,并粘贴标签,注明日期,公猪品种,耳号及精液编号等,瓶装精液便于输精操作。

只有60%12下精子呈直线前进运动的精液,不能用于输精。合格的精子活力不能低于0.7级。

新鲜精液在现场如即采即用,可用等渗的葡萄液或等渗的葡萄糖生理盐水做63~5min 8倍的稀释。这种方法省事又有效。

精子畸形率的检查

抗生素等添加剂必须在稀释消毒冷却室温后再加入,否则影响其效价。

检查方法:将精液做成抹片,自然凉干,浸入95%酒精,3分钟后,取出用清水冲洗阴干,然后用美兰或兰墨水染色3分钟,用清水冲洗阴干,在400—600倍的显微镜下检查。一般每次要数200个以上的精子。

3.6 注意事项

澳门银河国际 ,精子畸形率计算公式为:精子畸形率不能高于15%。高于15%的不能使用。

分装后的精液如果要保存备用,则不可立即放入17℃左右的恒温冰箱内,应先留在冰箱外 1h左右,让其温度下降,以免因温度下降过快而刺激精子,造成死精子等增多。

精液稀释

从放人冰箱开始,每隔12h,要摇匀一层精液,因精子放置时间一长,会大部分沉淀。每次摇动时,动作要轻缓均匀,同时观察精液的色泽状况,并做好记录,发现异常及时处理。

稀释液用溶质应为试剂级。

保存过程中,要切实注意冰箱内温度的变化,以免因意想不到的原因而造成电压不稳而导致温度升高或降低。

稀释液的配制:葡萄糖稀释液 葡萄糖5克,蒸馏水100毫升。

远距离购买精液时,运输是关键的环节。高温的夏天,一定要在双层泡沫保温箱放入冰块,再放精液进行运输,以防止天气过热,死精太多,严寒的季节,要采取保温措施防止精液因寒冷使精子死亡。

糖一柠一卵稀释液。

葡萄糖5克,柠檬酸钠0.5克,蒸馏水 100毫升,卵黄5毫升。

奶粉稀释液 脱脂奶粉9克,蒸馏水100毫升。

“卡铺”稀释液

葡萄糖6克,柠檬酸钠0.35克,碳酸氢 钠0.12克,乙二胺四乙酸二钠0.37克,蒸馏水100毫升。

上述各稀释液按配方先将糖类、奶粉及柠 檬酸钠等溶于蒸馏水中,过滤后蒸气消毒30分钟,取出凉至30—35℃时,加入卵黄,然 后,以每100毫升加入青霉素、链霉毒各5万单位,搅拌均匀备用。

精液稀释

稀释精液时,稀释液温度应与精液温度相等。温度应在20℃一28℃。精液稀释应在无菌室内进行,将稀释液缓慢倒入精液中慢慢摇匀。稀释后,每毫升精液应含有效精子0.5亿。

6、精液的分装、贮存、运输

分装

精液稀释后,取样检查活力,合格者才能分装。分装时,用量筒按剂量量取精液倒人容器,一般每头份20毫升。分装完后,即将容器密封,贴上标签。

贮存

精液分装后,避光贮存,在温度10℃- 15℃条件下贮存。

运输

用毛巾、棉花等包裹贮精容器,装入 10℃-15℃冰壶或泡沫箱等恒温器中运输,防止受热、震动和碰撞。

输精

发情鉴定

发情初期

母猪精神不安,食欲减少或不吃,叫鸣, 外阴部微充血肿胀,四处游走、张望、喜爬其他猪,但不接受其他猪爬跨,特别在清晨表现更明显。持续时间12—48小时。多数为24小时。

发情中期

母猪精神兴奋接受其他猪爬跨,食欲减少或停止。外阴部充血肿胀明显,阴道粘液光润透明。持续时间6—36小时。

发情后期

母猪发情迟滞、喜卧,外阴部肿胀稍退, 阴道粘膜充血稍减,由深红色变浅红色,阴道粘液变粘稠。持续时间12—24小时。

休情期

母猪精神状态安定,食欲恢复正常。

输精时机

母猪辅精时机以发情后期为好,当按压母猪腰尻部,母猪表现很安定,两耳竖立或出现“静立反应”,此时是输精最佳时机。如用公猪试情,一般在母猪愿意接受公猪爬跨后的4— 8小时之内输精为宜。

输精准备

输精场所应保持安静清洁,输精器械必须严格消毒。

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